Zgjedhja e kulturave të duhura është thelbësore për të siguruar rritjen optimale të qelizave dhe rezultatet eksperimentale. Kur zgjidhni enët e kulturës qelizore, është e rëndësishme të merren parasysh faktorë të tillë si lloji i qelizës, qëllimi specifik i kulturës suaj, shkalla e kulturës, lloji i mjedisit të kulturës, materialet dhe madhësia e enëve, trajtimet sipërfaqësore, kapakët për mënyrën e duhur. shkëmbimi i gazit dhe përputhshmëria e tyre me pajisjet tuaja laboratorike.
Këtu janë faktorët kryesorë që duhen marrë parasysh kur zgjidhni enën e duhur të kulturës qelizore
1. Zgjidhni enën e kulturës së qelizave bazuar në llojin e qelizave
Qelizat ngjitëse
Këto qeliza kanë nevojë për një sipërfaqe për t'u ngjitur dhe përhapur. Për qelizat ngjitëse, do t'ju nevojiten enë me një sipërfaqe që ofron hapësirë të mjaftueshme për ngjitjen dhe rritjen e qelizave.
Shembuj Balona të trajtuara me kulturë indi, enë Petri dhe pjata me shumë pusi.
Qelizat pezulluese
Këto qeliza rriten duke lundruar në mjedis, kështu që një sipërfaqe nuk merret parasysh.
2. Zgjidhni enën e kulturës qelizore bazuar në madhësinë (Kapaciteti i vëllimit)
Kulturat në shkallë të vogël
Për eksperimente në shkallë të vogël ose ekzaminim me performancë të lartë, anijet më të vogla janë ideale.
Shembuj Pllaka me shumë pusi (pllaka kultivimi me 6, 24, 96 qeliza),
Enët Petri, ose balonat T25.
Kulturat në shkallë të gjerë
Nëse keni nevojë të rritni sasi të mëdha qelizash, enët ose bioreaktorët më të mëdhenj janë më të mirë.
Shembuj të balonave të kulturës qelizore T75 dhe T175, bioreaktorëve ose balonave spinner për kulturat qelizore pezull.
3. Zgjidhni enën e kulturës së qelizave bazuar në trajtimin sipërfaqësor
Sipërfaqet e trajtuara me kulturë indi
Enët para-trajtohen për të nxitur lidhjen e qelizave, duke i bërë ato të përshtatshme për llojet e qelizave ngjitëse. Këto në përgjithësi janë të veshura me substanca si kolagjeni, fibronektina ose përbërës të tjerë të matricës jashtëqelizore.
Sipërfaqet e patrajtuara
Ideale për kulturat e pezullimit ose kur qelizat nuk kanë nevojë të ngjiten në sipërfaqe. Zakonisht përdoren për qelizat që rriten lirshëm në mjedis.
4. Zgjidhni enën e kulturës qelizore në bazë të materialit
Polistireni përdoret zakonisht për aplikime standarde të kulturës qelizore. Është e qartë, duke lejuar një inspektim të lehtë vizual dhe funksionon mirë si për qelizat ngjitëse ashtu edhe për ato pezulluese.
Polikarbonati ose polipropileni përdoren për aplikime të caktuara të bioreaktorëve dhe për anije që kërkojnë më shumë fleksibilitet ose trajtime specifike sipërfaqësore.
Qelqi i përdorur për kulturën standarde të indeve për shkak të kostos dhe thyershmërisë, enët prej qelqi mund të jenë të përshtatshme për aplikime specifike ose kultura në shkallë të gjerë.
Fols
Për kulturën e përgjithshme të qelizave, zakonisht përdoren T-flaska (T25, T75, T150). Sipërfaqja e sheshtë ofron një zonë të mirë për ngjitjen dhe rritjen e qelizave. Ato mund të përdoren si për qelizat ngjitëse ashtu edhe për kulturat e pezullimit nëse mbahen kushtet e duhura.
Enët Petri
E zakonshme për kulturat e shkallës së vogël dhe për eksperimentet që kërkojnë vëzhgim, të tilla si analizat e formimit të kolonive.
Pllaka me shumë pusi
Këto janë të dobishme për shqyrtimin e performancës së lartë dhe eksperimentet në shkallë më të vogël. Pllaka me 6, 12, 24, 48,
96, ose 384 puse janë të disponueshme dhe janë ideale për analizat e bazuara në qeliza, çlirimin e citokinës, testimin e ilaçeve dhe aplikacione të tjera me performancë të lartë.
Fleta tjerrëse
Përdoret për kultura qelizore pezull, veçanërisht në vëllime më të mëdha ku nxitja e kontrolluar është e nevojshme për të ruajtur rritjen e qelizave dhe për të shmangur grumbullimin e qelizave.
Bioreaktorët
Për kulturën e pezullimit në shkallë të gjerë, bioreaktorët lejojnë kontroll më kompleks mbi kushtet e mjedisit (p.sh., pH, temperaturë, oksigjenim) dhe përdoren për prodhim në vëllim të madh, si p.sh. në prodhimin biofarmaceutik.
6. Zgjidhni enën e kulturës së qelizave bazuar në sterilitetin dhe ventilimin
Steriliteti
Sigurohuni që ena të jetë sterile ose të jetë sterilizuar për të shmangur kontaminimin. Shumica e enëve të kulturës komerciale janë të para-sterilizuara, por gjithmonë kontrolloni paketimin.
Ventilimi
Disa enë, të tilla si balonat, vijnë me kapakë të ajrosur ose filtra për të lejuar shkëmbimin e ajrit duke parandaluar kontaminimin. Kjo është thelbësore kur kultivohen qelizat në kushte me densitet të lartë.
7. Zgjidhni enën e kulturës së qelizave bazuar në lehtësinë e përdorimit
Autoklavuese kundrejt të disponueshme
Disa enë kulture mund të autoklavohen për ripërdorim (p.sh., shishe qelqi, disa balona plastike), ndërsa të tjerat janë një përdorimshe dhe të disponueshme (p.sh., enë plastike, pjata me shumë pusi).
Trajtimi dhe transporti
Merrni parasysh lehtësinë e transferimit të qelizave midis enëve. Për shembull, pllakat me shumë puse mund të kërkojnë pllaka të specializuara për përdorim të lehtë me pajisje të tilla si pipetorët e automatizuar.
8. Zgjidhni enën e kulturës qelizore bazuar në vëllimin e mjedisit të kulturës
Zgjidhni një enë që mund të akomodojë vëllimin e dëshiruar të mediumit të kulturës pa humbur burime. Nëse punoni me një kulturë me vëllim të lartë, mund të nevojiten balona ose bioreaktorë më të mëdhenj, ndërsa vëllime më të vogla janë të përshtatshme për enët ose pjatat e kulturës qelizore.
9. Zgjidhni enën e kulturës së qelizave bazuar në konsideratat e kostos
E disponueshme kundrejt ripërdorshme
Enët plastike të njëpërdorshme janë me kosto efektive dhe zvogëlojnë rrezikun e kontaminimit, por ato mund të jenë të shtrenjta për operacione në shkallë të gjerë. Enët prej qelqi të ripërdorshme kanë një kosto më të lartë fillestare, por mund të sterilizohen dhe ripërdoren disa herë, duke i bërë ato më ekonomike për përdorim afatgjatë.
Efikasiteti i vëllimit
Sigurohuni që madhësia e enës të jetë e përshtatshme për të shmangur humbjen e materialeve, veçanërisht kur përdorni mjete të shtrenjta rritjeje ose reagentë.
10. Zgjidhni enën e kulturës qelizore bazuar në kërkesat specifike të aplikimit
Imazhe
Nëse keni nevojë të vizualizoni qelizat nën një mikroskop, zgjidhni enë me materiale optikisht të qarta dhe dimensione të përshtatshme për konfigurimin tuaj të imazhit (p.sh., pllaka me shumë puseta për ekzaminim me përmbajtje të lartë ose enë me fund xhami për imazhe me qeliza të gjalla).
Agjitacion i kontrolluar
Për kulturat e qelizave pezull, merrni parasysh shiritat rrotullues ose bioreaktorët që ofrojnë agjitacion të kontrolluar për t'i mbajtur qelizat pezull në mënyrë të barabartë.
konkluzioni
Zgjedhja e enëve të duhura të kulturës qelizore kërkon balancimin e disa faktorëve, duke përfshirë llojin e qelizës, shkallën e kulturës, përputhshmërinë e materialit dhe nevojat specifike eksperimentale. Qelizat ngjitëse do të kërkojnë sipërfaqe që nxisin ngjitjen, ndërsa qelizat e pezullimit përfitojnë nga vëllime dhe agjitacion më të madh. Për punë në shkallë të vogël, mund të mjaftojnë pllaka me shumë pus ose balonat T, ndërsa kulturat më të mëdha mund të kërkojnë shishe me rrotullues ose bioreaktorë. Gjithmonë sigurohuni që enët të plotësojnë kërkesat tuaja për sterilitetin dhe trajtimin, dhe merrni parasysh efektivitetin e kostos bazuar në përdorimin tuaj.
Duke marrë parasysh këta faktorë, ju mund të zgjidhni enën optimale që ofron kushtet e duhura për kulturën tuaj qelizore dhe qëllimet eksperimentale.